尊龙凯时的酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种广泛应用的免疫检测技术,旨在检测和量化特定的蛋白质及其他生物分子。该技术依赖于抗原与抗体之间的特异性结合以及酶催化的信号放大,从而实现对目标分子的高灵敏度检测。
ELISA样本处理
ELISA检测的核心在于为实验提供可靠的数据基础。为了确保实验结果的可靠性,必须严格遵循全面的质量控制措施。在收集样本之前,应制定详细的实验计划。
注意事项
1. 每个样本的收集体积需为100μl乘以检测项目数量;若做重复孔则要增加相应的体积。
2. 如果计划在一周内进行检测,样本可以在2-8°C保存;若暂时不进行检测,应分装后冷冻存储于-20°C或-80°C,避免反复冻融。
3. 试剂盒的检测范围与样本中的待测物浓度范围可能不一致,建议通过文献预估样本浓度,并利用预实验确认。
4. 在采集血清标本时,需避免溶血现象,因为红细胞溶解会释放具有过氧化物酶活性的物质,从而增加非特异性显色的风险。
5. 为确保尿液检测的准确性,必须正确收集尿液标本,使用清洁干燥的一次性容器,以避免污染,且尿液样本应及时检测或妥善保存。
6. 标本在检测时应尽量新鲜,若有细菌污染可能会导致假阳性反应。因此,应避免在冰箱中保存时间过长。
7. 若需多次检测待测样本,建议分装存放,以减少冻融对蛋白质效价的影响。
标本类型
尊龙凯时的ELISA常见标本包括液体类标本,如血清、血浆、尿液、细胞上清液及脑脊液等。
标本保存
通常情况下,5天内需测定的血清标本可以在4°C保存。保存时间超过一周需在-20°C下保存,以避免因保存时间过长导致的样本变性。
标本处理步骤
1. 血清:在室温下让血液静置10-20分钟后离心20分钟(2000-3000转/分),仔细收集上清;如有沉淀再次离心。
2. 血浆:根据要求选择合适的抗凝剂,混匀后离心处理,注意收集清液。
3. 尿液:使用无菌管收集,离心后收集上清,避免沉淀影响检测。
4. 细胞培养上清:在无菌条件下收集,加强分泌成分的检测。
5. 组织标本:切割后快速冷冻并处理,确保样本在适宜条件下保存。
6. 提取样本后,应尽快进行实验,避免重复冻融。
通过以上步骤和注意事项,确保在尊龙凯时的ELISA测试中获得可靠的实验数据,为生物医学研究提供有效支持。