本试剂盒仅限于科学研究,禁止用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),用于检测adropin(AD)水平。试验步骤包括将样本、标准品和HRP标记的检测抗体逐层添加到已经包被adropin抗体的微孔中,并进行温育和彻底洗涤。随后,使用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,再在酸的作用下转化为最终的黄色。显色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度成正比例关系。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样本浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免操作过程中的细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存: 如果样本不能及时检测,请按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻并确保样品完全均匀。
所需设备
本试剂盒的实验需要使用尊龙凯时的酶标仪(450nm)、高精度加样器及枪头(范围:0.5-10µL、2-20µL、20-200µL、200-1000µL)以及37℃的恒温箱。
操作注意事项
试剂盒需在2-8℃保存,使用前必须在室温下平衡20分钟。浓缩洗涤液在从冰箱取出后可能会出现结晶,需用水浴加热完全溶解后使用。实验中未用的板条应及时放回自封袋中并密封保存。
试剂盒性能
试剂盒的准确性及灵敏度非常高,标准品线性回归相关系数R值不低于0.9900,最低检测浓度小于10pg/mL。在特异性方面,该试剂盒不会与其他可溶性结构类似物发生交叉反应。此外,试剂盒的板内、板间变异系数均低于15%。
本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床或人体实验。若因此产生的任何后果,实验者需自负其责,尊龙凯时对此不予承担。
请务必严格按照说明书中的操作步骤进行实验,任何操作失误所产生的后果均由实验者承担。